蛋白质免疫共沉淀

技术简介：

蛋白质免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。Co-IP确定的存在相互作用关系，但这种相互作用并不能确定使用直接作用还是间接作用。

其优点为：（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点为：（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。


实验流程：

微信截图_20190821154301.png


结果展示：



结果分析：

1. 阳性对照组条带清晰无杂带，阴性对照组正常，表明CO-IP实验结果可信，操作合格。

2. 实验组均有目的条带，表明A蛋白和蛋白B可发生直接结合。


客户提供：

  1. 目的蛋白信息（Protein A、Protein B）

  2. 需检测的细胞样品（Protein A、Protein B均可表达，可不需阳性样）

  3. 适用于IP的一抗（Protein A）及其说明书

  4. 适用于Western Blot的一抗（Protein B）及其说明书

实验周期：2周


欢迎来电咨询：400-9933-522