一、技术简介:
荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase) 活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成 oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence),可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光,常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。
二、提供的服务:
1) 验证miR同mRNA靶向互作。将待测mRNA的预测靶向序列插入报告基因载体,再共转入该miR mimics,如果萤光素酶活性下降,则提示为其靶序列。
2) 验证miR同lncRNA靶向互作。将候选的lncRNA预测靶向序列插入报告基因载体中F-Luc的3’UTR区域,检测萤光素活性。
3) 启动子结构分析。将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体中替换启动子序列,检测其启动子活性。
4) 验证特定转录因子同其调控序列的作用。将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同时在实验细胞中共转过表达该转录因子,可分析转录因子过表达是否提高萤光素酶活性。
三、实验流程:
编号 | 可提供的载体名称 |
1 | pGL4.17[luc2/Neo] 信号通路报告载体 |
2 | pLuc2-hRluc(pGL4.10-hRluc) 信号通路报告载体 双荧光素酶luc2+hRluc |
3 | pGL3-hRluc 双荧光素酶报告基因载体同时含有萤火虫荧光luc+和海肾荧光Rluc |
4 | pGL3-basic 荧光素酶报告基因载体(萤火虫荧光) |
5 | pmirGLO,pMir-Glo circRNA 3'UTR miRNA功能研究载体,荧光素酶报告系统质粒 |
1. 客户提供:基因信息,作用位点
2.片段合成—构建载体—转染细胞—检测荧光强度—提供实验报告
3.实验周期:20个工作日
四、联系方式:
电话:13816429514(微信) 021-61733168