一文教你读懂外泌体NTA报告

2024-03-25 11:52
57


一文教你读懂外泌体NTA报告

外泌体 (Exosomes) 是细胞分泌到胞外的一种囊泡 (Extracellular Vesicles,EVs) ,其大小一般为30-150nm,具有双层膜结构和茶托状形态,含有丰富的内含物 (包括核酸、蛋白和脂质等),参与细胞间的分子传递。外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中,包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等,同时也存在于组织样本中,如脑组织、肌肉组织、脂肪组织等。

   经过一系列实验处理,获得所需的外泌体之后,我们需要对外泌体进行表征,需要准确定义获得的外泌体的粒径大小、分离后得到的颗粒总数、蛋白总量、测定外泌体特异性标志物、表征形貌等。

   纳米颗粒跟踪分析技术(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)是利用光散射和布朗运动的特性获得液体悬浮液中的样本粒度分布的检测方法。它能对悬浮液中粒径分布范围较宽的颗粒进行全方位表征,NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一,相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。

NTA实验做好,面对到手的图文数据,你是否能够快速准确的找到有用的重要信息呢?今天,我们就一起来解读NTA报告。

图1. 粒径-浓度分布图

图1是外泌体三次重复NTA检测数据图, 数据采用Finite Track Length Adjustment (FTLA)进行分析。

图2. 粒径-平均浓度分布图

图2是外泌体三次重复检测数据的平均值图,数据采用Finite Track Length Adjustment (FTLA) 进行分析,红色区域误差线表示三次重复数据平均值的标准偏差。

图3. 粒径-强度散点图

图3是外泌体粒径大小与强度分布的散点图。

图4. 重要数据示意图

   图4中A表示的是外泌体粒径大小,B表示的是样本原始颗粒浓度,C表示的是粒径浓度分布图,D上机稀释倍数。




图5. 结果数据示意图

图5中,Mean表示均值粒径,Mode表示众数粒径,SD为标准差,D10、D50、D90代表的含义是10%、50%、90%的颗粒数所测得的尺寸值。 D10为边界粒径。颗粒累积分布为10%的粒径。即小于此粒径的颗粒数含量占全部颗粒数的10%; D50为中位粒径。颗粒累积分布为50%的粒径,也叫中值粒径。这是一个表示粒度大小的典型值,该值准确地将总体划分为二等份,也就是说有50%的颗粒粒径超过此值,有50%的颗粒粒径低于此值; D90为边界粒径。颗粒累积分布为90%的粒径。即小于此粒径的颗粒数含量占全部颗粒数的90%。Mean +/- Standard Error为均值±标准偏差数据统计,Concentration为原始颗粒浓度,particles/frame为每视野颗粒数 ,centres/frame为每视野中心颗粒数。


小伙伴们,看完之后,有没有对NTA检测报告的解读更加清晰了呢,伙伴们记得加关注奥,关注研匠不迷路更多外泌体相关知识,我们下次见~


公众号底部图片.jpg