染色质免疫共沉淀技术

技术简介：

核酸和蛋白质是组成生命的主要生物大分子，两者的相互作用是构成生命活动的生长、繁殖、运动、遗传和代谢等生命活动的基础。研究蛋白质和核酸间的相互作用是人们探索生命现象奥秘的关键，CHIP检测实验是应用于蛋白与核酸互作关系的重要参考。CHIP实验在活细胞状态下固定蛋白质－DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。将ChIP与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq技术，能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段，研究体内转录因子和靶基因启动子区域直接相互作用的方法，对于调控蛋白在基因组上的结合靶点筛选、差异化表观遗传变异的原理揭示提供了重要的解决思路。


实验步骤：

Step1:细胞培养物交联和样品制备

Step2: 胞核制备和染色质消化

Step3: 染色质消化和浓度分析

Step4:染色质免疫沉淀法

Step5:将染色质从抗体/Protein G Magnetic Beads上洗脱下来并解交联

Step6:使用离心柱纯化 DNA

Step7: 用 PCR定量 DNA



结果展示：


送样要求：

目的基因或转录因子的相关背景资料；

动物：细胞系、低脂肪含量组织液氮速冻样本（细胞数大于5×106个）；

抗体：进口IP级别抗体/非商业化标准抗体（需检测）

样品运输：干冰运输，建议用灭菌的样品袋或LoBind 管，parafilm将管口密封好。



实验周期：2周


业务咨询：400-9933-522